Sistema FMUSP-HC: Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo (FMUSP) e Hospital das Clínicas da FMUSPCHARAO, Mariele F.MORO, Angela M.BRUCKER, NataliaBULCAO, Rachel P.BAIERLE, MariliaFREITAS, FernandoDURGANTE, JulianoNASCIMENTO, SabrinaBUBOLS, Guilherme B.SALDIVA, Paulo H.BOHRERE, DeniseGARCIA, Solange C.2013-07-302013-07-302012JOURNAL OF THE BRAZILIAN CHEMICAL SOCIETY, v.23, n.8, p.1441-1449, 20120103-5053https://observatorio.fm.usp.br/handle/OPI/942A method for the simultaneous quantification of lycopene, beta-carotene, retinol and alpha-tocopherol by high-performance liquid chromatography (HPLC) with Vis/fluorescence detection with isocratic elution was optimized and validated. The method consists of a rapid and simple liquid-liquid extraction procedure and a posterior quantification of extracted supernatants by HPLC. Aliquots of plasma were stored at -20 degrees C for three months for stability study. The methodology was applied to samples from painters and individuals not exposed to paints (n = 75). The assay was linear for all vitamins (r > 0.99). Intra-and inter-run precisions were obtained with coefficient of variation smaller than 5%. The accuracies ranged from 0.29 to -5.80% and recoveries between 92.73 and 101.97%. Plasma samples and extracted supernatants were stable for 60 days at -20 degrees C. A significant decrease of lycopene, beta-carotene and retinol concentrations in plasma from exposed individuals compared to non-exposed individuals (p < 0.05) was observed. The method is simple, reproducible, precise, accurate and sensitive, and can be routinely utilized in clinical laboratories.Um método para quantificação simultânea de licopeno, β-caroteno, retinol e α-tocoferol por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) com detecção no visível/fluorescente e eluição isocrática foi otimizado e validado. O método consiste de extração líquido-líquido rápida e simples e posterior quantificação do sobrenadante extraído por HPLC. Alíquotas de plasma foram estocadas a –20°C por três meses para estudo da estabilidade. Aplicação metodológica foi realizada em amostras fornecidas por pintores e indivíduos não expostos a tintas (n = 75). O ensaio foi linear para todas as vitaminas analisadas (r > 0,99). Precisões intradia e interdia apresentaram coeficiente de variação (CV) menor que 5%. Exatidões variaram de 0,29 a –5,80% e recuperações entre 92,73 e 101,97%. Amostras de plasma e sobrenadante extraído foram estáveis por até 60 dias a –20°C. Foi demonstrada uma diminuição significativa nas concentrações de licopeno, β-caroteno e retinol em indivíduos expostos quando comparados com os não-expostos (p < 0,05). O método é simples, reprodutível, preciso, exato e sensível, e pode ser utilizado na rotina de laboratórios clínicos.engopenAccessretinolalpha-tocopherollycopenebeta-caroteneHPLCliquid-liquid extractionperformance liquid-chromatographyhuman serumelectrochemical detectionvitamin-avalidationantioxidantsstandardarticleCopyright SOC BRASILEIRA QUIMICA10.1590/S0103-50532012005000001Chemistry, Multidisciplinary